腫瘤切除手術(shù)中，往往會因為過度切除而傷害周圍組織或由于切除不徹底而影響病人預(yù)后。為了降低復(fù)發(fā)率和改善患者術(shù)后生存質(zhì)量，腫瘤的精準切除已成為手術(shù)的趨勢，而術(shù)中引導(dǎo)對外科醫(yī)生來說變得至關(guān)重要。

目前，外科醫(yī)生在術(shù)中主要依賴視覺和觸覺反饋。X射線、PET/CT或MRI等成像方式，主要用于術(shù)前診斷、手術(shù)計劃或中期評估，但他們卻很難整合至手術(shù)室場景中。雖然已經(jīng)有不少醫(yī)院開始裝備術(shù)中影像設(shè)備，但由于成本高以及實際操作復(fù)雜而推進緩慢。

熒光引導(dǎo)手術(shù)

為了破解技術(shù)瓶頸，實現(xiàn)更精準的腫瘤切除，一種叫做“熒光引導(dǎo)手術(shù)“(fluorescenceguidedsurgery，F(xiàn)GS)的術(shù)中導(dǎo)航技術(shù)逐漸成為外科醫(yī)生的“寵兒”。該技術(shù)利用特定波長激發(fā)光照射，激發(fā)腫瘤自身熒光、滯留的熒光分子或細胞攝取的外源性熒光物質(zhì)發(fā)出熒光，引導(dǎo)術(shù)者對腫瘤進行精準切除。

熒光引導(dǎo)手術(shù)多采用近紅外熒光(NIR，700-900nm)，如ICG、Cy5和 IRDye800CW等。與可見光相比，NIR熒光組織穿透性好(5-10mm)、散射小、背景熒光低，更適合臨床在體成像。目前，吲哚菁綠(ICG)已作為目前唯一一個被批準用于臨床的NIR熒光已在肝癌顯影和前哨淋巴結(jié)顯影等應(yīng)用上已初見成效。但由于ICG本身并不具有腫瘤靶向性，自此，具有靶向性的熒光分子探針開始進入人們的視野。

術(shù)中熒光分子探針成像原理

上圖：靶向熒光分子探針的潛在應(yīng)用示意圖。

下圖：在開放和腹腔鏡手術(shù)中實施熒光引導(dǎo)。經(jīng)靜脈注射后的示蹤劑(手術(shù)前1小時以內(nèi)，視示蹤劑而定)、腫瘤或其他目標組織使用專業(yè)的近紅外攝像機，從而指導(dǎo)外科醫(yī)生實時切除。立即切除后，標本可以在手術(shù)室內(nèi)的后桌(用來分析的桌子)上成像用熒光照相機和顯微鏡觀察組織樣本。因此，病理學(xué)家可以快速檢查切除邊緣上的熒光，并提供快速反饋給外科醫(yī)生。

靶向熒光分子探針

靶向熒光探針通常由三部分組成：識別基團(recognitionelement)、報告基團(fluorophore)和連接體(linker)。識別基團決定了探針的選擇性和特異性，報告基團決定了其靈敏度，而連接體則可以調(diào)節(jié)探針的大小、藥代動力學(xué)、生物分布和帶電情況等特性。

識別基團是探針最核心的部分，主要有兩種識別策略：一是利用癌細胞表面過表達的受體，如葉酸受體和EGFR等;二是利用腫瘤組織中過表達的酶，如組織蛋白酶(cathepesins)和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)等，這些酶往往和腫瘤的擴散和轉(zhuǎn)移有關(guān)。

A：探針結(jié)構(gòu)

B：基于配受體結(jié)合的探針

C：基于酶激活的探針

靶向熒光分子探針的應(yīng)用

熒光分子影像借助分子探針和熒光內(nèi)鏡設(shè)備，將肉眼不可見的腫瘤“精準點亮”，廣泛應(yīng)用于手術(shù)導(dǎo)航和早期診斷。

手術(shù)導(dǎo)航

手術(shù)殘留和預(yù)后不良以及癌癥復(fù)發(fā)息息相關(guān)，而過度切除則可能傷害周圍正常組織。因此判斷腫瘤邊界十分重要。靶向熒光探針能夠在術(shù)中實時點亮癌細胞，幫助醫(yī)生判斷腫瘤邊界和發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶，這一概念也就是上文提到的熒光引導(dǎo)手術(shù)。

世界首例熒光導(dǎo)航卵巢癌切除術(shù)

早期診斷

在我國，消化道惡性腫瘤的發(fā)病率和死亡率遠高于世界平均水平。早期消化道癌癥其實并不可怕，預(yù)后良好，治療后5 年的生存率高達90%。內(nèi)鏡是消化道早癌診斷的主要工具，但現(xiàn)有的內(nèi)鏡檢查技術(shù)并不能滿足胃腸癌診斷的臨床需要，早癌診斷率不足20%。

靶向熒光探針可特異性點亮病變細胞，幫助醫(yī)生發(fā)現(xiàn)容易疏漏的病變，提高早癌的檢出率。

EMI-137探針可提高結(jié)直腸病變的檢出率

熒光探針臨床研究的現(xiàn)狀

目前，靶向熒光分子探針的研究國外明顯領(lǐng)先于國內(nèi)，其中BLZ-100、OTL38、EMI-137和貝伐單抗-IRDye800CW等靶向熒光探針已進入臨床研究，其中OTL38 針對卵巢癌的臨床試驗已進入III期，此外還有一系列探針正在臨床前開發(fā)中。