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mRNA-EP制備的腫瘤血管靶向CAR-T細胞用于臨床研究的免疫學質量和性能

Kanako Inoo , Ryo Inagaki , Kento Fujiwara , Shigemi Sasawatari , Takashi Kamigaki , Shinsaku Nakagawa , Naoki Okada

摘要：

我們先前報道了用血管內皮生長因子受體2(VEGFR2)特異性嵌合抗原受體(CAR)基因工程。改造的腫瘤血管重定向T細胞在各種鼠實體瘤模型中表現出顯著的抗腫瘤作用。在本研究中，我們通過CAR編碼mRNA電穿孔(mRNA-EP)制備了抗VEGFR2 CAR-T細胞，并分析了其免疫學特征和功能，用于臨床研究。在mRNA-EP后6-12小時達到峰值后，檢測到鼠和人T細胞上抗VEGFR2 CAR的表達，效率約為100%，持續數天。將鼠抗VEGFR2 CAR-T細胞三重轉移至B16BL6荷瘤小鼠中，結果證明其抗腫瘤作用與用逆轉錄病毒載體改造的CAR-T細胞單次轉移的抗腫瘤作用相當。通過活力、生長和表型參數確定，mRNA-EP未對人T細胞特征造成任何損傷或缺陷。此外，表達不同CAR構建體的兩種人抗VEGFR2 CAR-T細胞以抗原特異性方式分化為效應期，具有細胞因子分泌和細胞毒活性。這些結果表明，我們通過mRNA-EP制備的抗VEGFR2 CAR-T細胞在質量和性能方面具有潛力，為作為細胞醫學的臨床研究提供安全性和有效性的前景。